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抗乳鐵蛋白單克隆抗體的特異性是什么?

 更新時間:2020-10-27    點擊量:814
   抗體是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。
  乳鐵蛋白是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結(jié)合糖蛋白,中性粒細(xì)胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。主要由乳腺上皮細(xì)胞表達(dá)和分泌。
  抗乳鐵蛋白單克隆抗體對由第1單克隆抗體和第二單克隆抗體組成,所述第1單克隆抗體由保藏的雜交瘤細(xì)胞株分泌得到,所述第二單克隆抗體由保藏的雜交瘤細(xì)胞株分泌得到。本發(fā)明還提供了如上所述的人乳鐵蛋白單克隆抗體對在制備檢測人乳鐵蛋白的試劑盒中的用途。通過上述技術(shù)方案,本發(fā)明能夠通過雙抗夾心免疫試紙檢測方法,對人乳鐵蛋白的檢測取得的靈敏度,對牛乳鐵蛋白和羊乳鐵蛋白不呈現(xiàn)交叉反應(yīng),并且對人溶菌酶轉(zhuǎn)基因牛、人α?乳清白蛋白轉(zhuǎn)基因牛不呈現(xiàn)交叉反應(yīng),具有較高的敏感度和特異性。
  抗乳鐵蛋白單克隆抗體的特異性:抗乳鐵蛋白單克隆抗體和人轉(zhuǎn)鐵蛋白沒有交叉反應(yīng),但是單克隆抗體和人轉(zhuǎn)鐵蛋白交叉反應(yīng)微弱。
  單克隆抗體制備的基本過程如下:
  (1)用抗原免疫小鼠;
  (2)從抗原免疫過的小鼠獲取脾細(xì)胞;
  (3)應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞不僅能夠像B淋巴細(xì)胞一樣合成性質(zhì)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移性抗體,而且能夠像骨髓瘤細(xì)胞一樣無限復(fù)制,這樣就可以產(chǎn)生大量且性質(zhì)專一的鼠源抗體;
  (4)對獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選,選出能分泌高效價抗體的雜交瘤;
  (5)對已篩選出的單個細(xì)胞進(jìn)行鑒定和克隆。
  雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體在各個領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣,有很大的優(yōu)點和潛力。能夠根據(jù)需要進(jìn)行研發(fā)生產(chǎn),可建立穩(wěn)定的細(xì)胞株持續(xù)供給應(yīng)用,相比于抗血清能夠減少大量的動物和費用,而且純度高,均一性好,可作為一種標(biāo)準(zhǔn)試劑。
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