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地塞米松(Dexamethasone)ELISA檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)要描述:本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法定量檢測(cè)樣品中地塞米松的殘留量。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2017-02-24
  • 訪  問(wèn)  量:793
詳情介紹

一、原理

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法定量檢測(cè)樣品地塞米松殘留量。

二、適用范圍

定量檢測(cè)雞肉、豬肉等組織樣品中地塞米松的殘留。

、試劑盒特點(diǎn)及技術(shù)指標(biāo)

* 檢 測(cè) 時(shí) 間 : 40 min

* 試劑盒靈敏度: 0.2pb(µg/kg)

* 試劑盒提供工作濃度標(biāo)準(zhǔn)品,使用更方便;

* 試劑盒檢測(cè)樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度:

樣本

檢測(cè)下限

回收率

雞肉

1pb

70%-120%

豬肉

1pb

70%-120%

試劑盒特異性

藥物名稱

交叉反應(yīng)率(%)

地塞米松

100%

地克珠利

< 1%

、所需材料

儀器微孔板酶標(biāo)儀450 nm/630 nm、振蕩器離心機(jī)、刻度移液管(10 mL)洗耳球、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)、漏斗、分液漏斗、燒杯、定量分析濾紙

微量移液器:?jiǎn)蔚?1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:甲醇、去離子水。

、 試劑盒組成

序號(hào)

組成部分

96T裝量

1

地塞米松酶標(biāo)板

12×8孔

2

地塞米松標(biāo)準(zhǔn)品*6

1 mL

3

地塞米松酶標(biāo)物

7 mL

4

地塞米松抗體

7mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

2×地塞米松樣品稀釋液

40mL

*注:A、B、C、D、E、F 6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為:0ppb, 0.2ppb, 0.6ppb,1.8ppb, 5.4ppb, 16.2 ppb,直接使用。

六:溶液配制

配液1: 洗滌工作液

   用去離子水將20 ×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進(jìn)行稀釋。配好的洗滌工作液在4 ℃環(huán)境可保存一    個(gè)月,用前一天取出回溫。

配液2:  1×地塞米松樣品稀釋液     

   用去離子水將2×地塞米松樣品稀釋液按1:1體積比進(jìn)行稀釋,用于樣本的稀釋,配好后在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月,用前一天取出回溫。

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應(yīng)及時(shí)進(jìn)行下步檢測(cè),實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。

② 樣本數(shù)目超過(guò)8個(gè)時(shí)推薦使用排槍加樣。

雞肉、豬肉

  

  

、 酶標(biāo)免疫測(cè)定程序

  • 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其*回  升至室溫(20~25℃)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  •  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
  •  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、酶、抗體:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µL到對(duì)應(yīng)的微孔中,加入地塞米松酶標(biāo)物50µL/孔,再加入地塞米松抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃環(huán)境中反應(yīng)30min。
  •  洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,

加入洗滌工作液250µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內(nèi)液體,重復(fù)洗滌3次,zui后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。

  •  顯色:加入底物液A液50µL/孔,再加底物    

液B液50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。

  •  測(cè)定:加入終止液50µL/孔,用酶標(biāo)儀立即  測(cè)定450nm處的吸光度值(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm)檢測(cè)。

、 結(jié)果判定

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以地塞米松標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中地塞米松實(shí)際濃度。(詳見(jiàn)試劑盒專業(yè)分析軟件,以便進(jìn)行大量樣本的分析計(jì)算。)

、 注意事項(xiàng)

洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過(guò)了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號(hào)的試劑。

④ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。

⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時(shí)間為10~15min即可。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到20min,反之則減短反應(yīng)時(shí)間。

十一、貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質(zhì) 期: 12個(gè)月

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