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血液RNA核酸免提取試劑盒

簡要描述:血液RNA核酸免提取試劑盒

試劑盒應(yīng)用
本試劑盒采用特殊裂解液B從新鮮全血、抗凝血、血凝塊中提取并純化RNA。整個過程僅需要10分鐘。采用硅基材質(zhì)吸附柱,高效專一吸附RNA,保證提取高純度、高產(chǎn)量RNA。該裂解液配方中含有RNA保護(hù)劑,能夠抑制RNA降解、保護(hù)RNA完整,從而提高RNA產(chǎn)量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文庫構(gòu)建等。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-04-27
  • 訪  問  量:529
詳情介紹

血液RNA核酸免提取試劑盒

 

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用特殊裂解液B從新鮮全血、抗凝血、血凝塊中提取并純化RNA。整個過程僅需要10分鐘。采用硅基材質(zhì)吸附柱,高效專一吸附RNA,保證提取高純度、高產(chǎn)量RNA該裂解液配方中含有RNA保護(hù)劑,能夠抑制RNA降解、保護(hù)RNA完整,從而提高RNA產(chǎn)量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文庫構(gòu)建等。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

 

試劑盒組成

組分

Col-R030150T

編號

裂解液B

35 mL

Col-R0301A

洗滌液BW1

25 mL

Col-R0301B

洗滌液BW2

12 mL

Col-R0301C

洗脫液B

5 mL


RNA吸附柱

50

Col-R0301E

備注:1、第一次使用前,在洗滌液BW2中加入48mL無水乙醇,并標(biāo)記"和時間,避免重復(fù)加入。

 

保存條件

室溫保存一年。

 

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、1.5mLRNase離心管、蛋白酶K20mg/mL,或貨號QR0301)、DNase I2U/μL,或貨號QR0102

 

使用方法

1. 300μL血液(不足300μL,無菌PBS補(bǔ)齊)中加入500μL裂解液B10μL蛋白酶K,顛倒混勻。

2. 55℃孵育2分鐘。

備注:如果RNA提取量比較低,可延長孵育時間到10分鐘。

3. 12,000rpm離心30秒。取750μL上清。

4. 加入0.5倍體積無水乙醇,上下顛倒混勻,

5. 全部加入RNA吸附柱中,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

6. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW1,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

7. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW2,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

8. 重復(fù)步驟7一次。

9. 12,000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。

10. RNA吸附柱放入新1.5mLRNase離心管中,加入30-50μL洗脫液B,室溫放置1分鐘。

11. 12,000rpm離心2分鐘,得到RNA溶液,-80℃保存。

 

注意事項(xiàng)

1. 務(wù)必在超凈臺中進(jìn)行操作,常換手套,防止RNA降解。

2. 盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取。

3. 使用無DNaseRNase的吸頭和離心管,防止RNA降解,常更換吸頭,防止交叉污染。

4. 為了提高洗脫效率,可提前將洗脫液B置于65℃水浴后再使用。

5. 根據(jù)后續(xù)試驗(yàn)需求,請使用DNase I(貨號QR0102)進(jìn)行基因組清除。

 

常見問題解析

問題

可能原因

推薦解決方案

RNA吸附柱

堵塞

(1)上樣量太高

(2)加入RNA吸附柱的液體中有固體成分或沉淀物

(1)減少上樣量。

(2)增加離心時間。

(3)切勿吸取到可見固體成分。

(4)再次離心。

RNA得率低

(1)未離心下來

(2)樣本量太大,裂解不充分

(1)減少樣本量。

(2)重復(fù)洗脫步驟一次。

RNA降解

(1)樣本不新鮮

(2)RNA酶污染

(1)使用新鮮樣本。

(2)使用保存在樣品保存液中樣本。

(3)樣本保存在-80℃甚至液氮中,盡可能現(xiàn)取現(xiàn)用。

(4)常更換手套。

(5)常更換吸頭和離心管。

(6)使用無DNaseRNase的吸頭和離心管。

 


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