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Nu-P01植物組織PCR試劑盒(免核酸提?。?/h1>

簡要描述:本試劑盒適用于煙草、擬南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麥等葉片和種子的PCR、熒光定量PCR 檢測。使用該試劑盒無需液氮研磨,無需使用有機(jī)試劑,無需重復(fù)離心便可獲得用于PCR反應(yīng)的基因組模板。
依托Nu-Smart®平臺(tái)DNA-Lysis采用zhu利配方,5分鐘內(nèi)獲得花瓣、花蕊、種子、葉片、根、莖等樣本的基因組DNA。葉片僅僅需取材1-4mm,取樣量小,減少對樣品的損耗。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2023-04-27
  • 訪  問  量:571

詳情介紹

NuSmart®植物組織PCR試劑盒

(免核酸提?。?/span>

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒適用于煙草、擬南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麥等葉片和種子的PCR、熒光定量PCR 檢測。使用該試劑盒無需液氮研磨,無需使用有機(jī)試劑,無需重復(fù)離心便可獲得用于PCR反應(yīng)的基因組模板。

依托Nu-Smart®平臺(tái)DNA-Lysis采用zhuan利配方,5分鐘內(nèi)獲得花瓣、花蕊、種子、葉片、根、莖等樣本的基因組DNA。葉片僅僅需取材1-4mm,取樣量小,減少對樣品的損耗。

預(yù)制的2×TaqMix (With Dye)只需要加入引物和模板DNA即可進(jìn)行PCR反應(yīng),減少移液次數(shù),實(shí)現(xiàn)高通量擴(kuò)增。該體系中添加有電泳緩沖液和染料,PCR結(jié)束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,使用方便快捷。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

 

試劑盒組成

組分

Nu-P010150T

Nu-P0102250T

DNA-Lysis

1 mL

5 mL

2×TaqMix (With Dye)

500 μL

2×1.25mL

 

保存條件

-20oC保存。

使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻,經(jīng)常使用可4℃保存。

2×TaqMix (With Dye)溶解后需置于冰上,避免反復(fù)凍融。

 

需要準(zhǔn)備

金屬恒溫浴、PCR

 

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 葉片的處理

1)用眼科剪或葉片取樣器剪取1-4mm葉片。

2加入20 μL DNA-Lysis。

3充分混勻。

4置于55℃作用5分鐘。溶液即為DNA模板。

 

2. 種子和果實(shí)的處理

1研磨后種子或1-2mm果肉放入離心管中。

2加入20 μL DNA-Lysis。

3充分混勻。

4置于55℃作用5分鐘。

510,000rpm離心1分鐘,上清即為DNA模板。

 

二、推薦PCR反應(yīng)體系


20 μL體系(推薦)

50 μL體系

2×TaqMix (With Dye)

10 μL

25 μL

引物1 (10 μM)

1 μL

2 μL

引物2 (10 μM)

1 μL

2 μL

DNA模板

0.5-2 μL

0.5-3 μL

ddH2O

補(bǔ)足至20 μL

補(bǔ)足至50 μL

※:引物濃度可以在0.1-0.5 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)節(jié)。

 

三、按照以下方法設(shè)定PCR反應(yīng)

步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

95 oC

5 min

1

變性

95 oC

15-30 s

 

35-40

退火

50~72 oC

30 s

延伸

72 oC

1 kb/min

徹di延伸

72 oC

5 min

1


4 oC

Hold

1

 

注意事項(xiàng)

一、試劑盒使用前注意事項(xiàng)

1)所有試劑應(yīng)按照zhi定溫度儲(chǔ)存。請勿反復(fù)凍融。

2)使用前后均需要對操作區(qū)進(jìn)行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均需使用商品化的無酶耗材。

3DNA-Lysis頻繁使用,可在4℃保存。長期不使用可放-20℃保存。

二、樣本注意事項(xiàng)

(1)不同葉片使用不同的取樣器進(jìn)行處理,防止交叉污染導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差。

(2)葉片剪取不宜過大,以1-4mm為宜。

(3)種子樣本大小不一,建議研磨后使用。

三、試劑盒使用過程中注意事項(xiàng)

(1)PCR過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。

(2)整個(gè)過程中使用的吸頭、離心管等耗材應(yīng)丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中,減少環(huán)境污染。

(3)2×TaqMix (With Dye)包含染料,可在反應(yīng)結(jié)束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。

(4)不能使用其他品牌的taq酶,進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測。

四、試劑盒使用后注意事項(xiàng)

(1)DNA-Lysis處理后的DNA模板可在-20℃保存至少1個(gè)月,如需長期保存,可離心后取上清置-80℃保存。避免反復(fù)凍融,防止基因組斷裂。

(2)PCR反應(yīng)完成后,嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)區(qū)開蓋。應(yīng)在污染區(qū)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,防止氣溶膠污染。

(3)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號(hào)試劑盒混用。


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