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氟苯尼考(Florfenicol)ELISA檢測試劑盒

簡要描述:氟苯尼考(Florfenicol)ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中氟苯尼考的殘留量。定量檢測豬尿樣品中氟苯尼考的殘留。

  • 產(chǎn)品型號:氟苯尼考
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2019-01-23
  • 訪  問  量:1214
詳情介紹

一、原理

氟苯尼考(Florfenicol)ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品氟苯尼考殘留量。

二、適用范圍

定量檢測豬尿樣品中氟苯尼考的殘留。

三、氟苯尼考(Florfenicol)ELISA檢測試劑盒特點(diǎn)及技術(shù)指標(biāo)

* 檢 測 時(shí) 間 : 50 min

試劑盒靈敏度: 1 ppb(µg/kg)

* 試劑盒檢測純陰性樣本的背景值<1ppb

試劑盒檢測樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度:

樣本

檢測下限

回收率

豬尿

20 ppb

70%-120%

 

試劑盒特異性

藥物名稱

交叉反應(yīng)率(%)

氟苯尼考

100 %

甲砜霉素

< 0.1 %

氟甲砜霉素

< 0.1 %

 

、所需材料

儀器微孔板酶標(biāo)儀450 nm/630 nm、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:單道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:去離子水

、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

氟苯尼考酶標(biāo)板

12×8孔

2

氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)品工作濃度*5

0.5-1 mL

3

氟苯尼考酶標(biāo)物

13 mL

4

氟苯尼考抗體

7 mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

2×氟苯尼考樣品稀釋液

40 mL

*注:5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為:0 ppb, 1 ppb, 3 ppb, 9 ppb, 27 ppb,A、B各1 mL,C、D、E各0.5 mL,直接使用。

六、溶液配制

配液1: 洗滌工作液

   用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進(jìn)行稀釋,用于酶標(biāo)板的洗滌,洗滌工作液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月,用前一天取出回溫。

配液2:  1×氟苯尼考樣品稀釋液     

   用去離子水將2×氟苯尼考樣品稀釋液按1:1體積比進(jìn)行稀釋,用于樣本的稀釋,配好后在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月,用前一天取出回溫。

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應(yīng)及時(shí)進(jìn)行下步檢測,實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。

② 樣本數(shù)目超過8個(gè)時(shí)推薦使用排槍加樣。

豬尿(稀釋倍數(shù):20)

豬尿需要用1×氟苯尼考樣品稀釋液稀釋至20倍,取50 μL用于分析,若渾濁需要先離心取上層分析。

、 酶標(biāo)免疫測定程序

  • 將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其*回升至室溫后方可使用,根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~2小時(shí)。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  •  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
  •  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µL 到對應(yīng)的微孔中,加入氟苯尼考抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20min
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,加入洗滌工作液300 µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內(nèi)液體,重復(fù)洗滌3次,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
  • 加酶標(biāo)物:加入氟苯尼考酶標(biāo)物100 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光孵育20 min。
  • 甩干孔內(nèi)液體,重復(fù)洗板3次,后一次用吸水紙拍干。
  • 顯色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物液B液50 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。
  • 測定:加入終止液50µL/孔,用酶標(biāo)儀立即  測定450/630nm處的吸光度值。

、 結(jié)果判定

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中氟苯尼考實(shí)際濃度。(詳見試劑盒專業(yè)分析軟件,以便進(jìn)行大量樣本的分析計(jì)算。)

、 注意事項(xiàng)

① 根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~3小時(shí),體積15毫升以上的優(yōu)先從冷藏環(huán)境取出 回溫。

②  洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。

⑤ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。

⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色    時(shí)間為10min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時(shí)間到15-20min,反之則減短反應(yīng)時(shí)間。

⑦ 底物液B液長期使用變?yōu)闇\藍(lán)色時(shí),請放心使用,不影響檢測結(jié)果。

十一、貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質(zhì) 期: 12個(gè)月

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