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伏馬毒素(Fumonisin B1)ELISA檢測試劑盒

簡要描述:伏馬毒素(Fumonisin B1)ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中伏馬毒素的殘留量。定量檢測糧食、飼料等樣品中伏馬毒素的殘留。

  • 產(chǎn)品型號:伏馬毒素
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2019-01-23
  • 訪  問  量:941
詳情介紹

一、原理

伏馬毒素(Fumonisin B1)ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品伏馬毒素殘留量。

二、適用范圍

定量檢測糧食、飼料等樣品中伏馬毒素的殘留。

、伏馬毒素(Fumonisin B1)ELISA檢測試劑盒特點及技術(shù)指標(biāo)

* 檢 測 時 間 : 30 min

* 試劑盒靈敏度: 2 ppb(µg/kg)

* 樣本處理方法簡單,并與玉米赤霉烯酮前處理方法部分統(tǒng)一化,節(jié)省了人力物力;

* 試劑盒提供工作濃度標(biāo)準(zhǔn)品,使用更方便;

* 試劑盒檢測樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度:

樣本

檢測下限

回收率

糧食

80ppb

70%-120%

飼料

80ppb

70%-120%

試劑盒特異性

藥物名稱

交叉反應(yīng)率(%)

伏馬毒素

100%

玉米赤霉烯酮

< 1%

、所需材料

儀器微孔板酶標(biāo)儀450 nm/630 nm、振蕩器離心機(jī)、刻度移液管(10 mL)、洗耳球、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:單道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:甲醇、去離子水。

、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

伏馬毒素酶標(biāo)板

12×8孔

2

伏馬毒素標(biāo)準(zhǔn)品*5

0.5-1 mL

3

伏馬毒素酶標(biāo)物

7 mL

4

伏馬毒素抗體

7mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

2×伏馬毒素樣品稀釋液

40mL

*注:A、B、C、D、E 5個標(biāo)準(zhǔn)品濃度為:0ppb, 2ppb, 6ppb, 18ppb, 54ppb,A、B標(biāo)準(zhǔn)品各1mL,其余各0.5mL,直接使用。

六:溶液配制

配液1: 洗滌工作液

用去離子水將20 ×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進(jìn)行稀釋。配好的洗滌工作液在4 ℃環(huán)境可保存一    個月,用前一天取出回溫。

配液2: 1 ×伏馬毒素樣品稀釋液        

用去離子水將2 ×伏馬毒素樣品稀釋液按1:1體積比進(jìn)行稀釋。配好1 ×伏馬毒素樣品稀釋液在4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫。

配液3: 樣品提取液

將甲醇與去離子水按V:V=4:1 體積比配制成80%甲醇,即樣品提取液。 

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應(yīng)及時進(jìn)行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。

② 樣本數(shù)目超過8個時推薦使用排槍加樣。

(一)全麥、全玉米、玉米粉、大米、花生粕、DDGS(稀釋倍數(shù):40倍)

① 稱取粉碎樣品1.0 g ± 0.05 g離心管中,加入 10 mL 樣品提取液(配液3), 震蕩提取1 min;

 4000 r / min離心5 min;

  ③ 小心移取上清液100 μL 加到300μL1 ×伏馬毒素樣品稀釋液中, 混勻,取50 μL用于分析。  

(二)乳豬料、豬育肥料、牛飼料(稀釋倍數(shù):40倍)

① 稱取粉碎樣品1.0 g ± 0.05 g離心管中,加入   5 mL 樣品提取液(配液3), 震蕩提取1 min

 4000 r / min離心5 min;

  ③ 小心移取上清液50 μL 加到450μL水中, 混勻,取50 μL用于分析。

、 酶標(biāo)免疫測定程序

  • 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其*回  升至室溫(20~25℃)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  •  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
  •  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、酶、抗體:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µL到對應(yīng)的微孔中,加入伏馬毒素酶標(biāo)物50µL/孔,再加入伏馬毒素抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃環(huán)境中反應(yīng)20min。
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,

加入洗滌工作液250µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內(nèi)液體,重復(fù)洗滌3次,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

  •  顯色:加入底物液A液50µL/孔,再加底物    

液B液50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。

  • 測定:加入終止液50µL/孔,用酶標(biāo)儀立即  測定450nm處的吸光度值(建議用雙波長450/630nm)檢測。

、 結(jié)果判定

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以伏馬毒素標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中伏馬毒素實際濃度。(詳見試劑盒專業(yè)分析軟件,以便進(jìn)行大量樣本的分析計算。)

、 注意事項

洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。說明書中未提及樣品,請致電技術(shù)客服咨詢。

反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。

④ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。

⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為10~15min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到20min,反之則減短反應(yīng)時間。

 未提及樣本請致電本公司技術(shù)服務(wù)部。

十一、貯藏條件及保存期

貯藏條件: 28

保 質(zhì) 期: 12個月

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