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磺胺類ELISA檢測試劑盒

簡要描述:磺胺類ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中磺胺類的殘留量。定量檢測組織樣本中磺胺類殘留。

  • 產(chǎn)品型號:磺胺類ELISA檢測試
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2019-01-23
  • 訪  問  量:802
詳情介紹

一、原理

磺胺類ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品磺胺類殘留量。

二、適用范圍

定量檢測組織樣本中磺胺類殘留。

三、磺胺類ELISA檢測試劑盒特點(diǎn)及技術(shù)指標(biāo)

* 檢 測 時 間 : 50min

  試劑盒靈敏度: 1ppb(µg/kg)

* 試劑盒檢測純陰性樣本的背景值<2ppb;

* 樣品處理方法簡潔,符合率大于95%;

試劑盒檢測樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度:

試劑盒交叉反應(yīng)率:

磺胺嘧啶110%、磺胺間甲氧嘧啶80%、磺胺甲噁唑80%、磺胺喹惡啉80%、磺胺氯噠嗪80%、磺胺噻唑60%、    80%、磺胺甲噻二唑80%、   80%、 胺對甲氧  83%磺胺噁唑80%、磺胺甲基嘧啶80%、磺胺二甲基嘧啶60%、磺胺奎瑟琳80%、磺胺甲氧嘧啶80%

 

 

、所需材料

儀器微孔板酶標(biāo)儀450 nm/630 nm均質(zhì)器、振蕩器離心機(jī)、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:單道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:去離子水、正己烷

、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

磺胺類酶標(biāo)板

12×8孔

2

磺胺類標(biāo)準(zhǔn)*5

0.5-1mL

3

磺胺類酶標(biāo)物

13 mL

4

磺胺類抗體

7 mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

2×磺胺類稀釋液

45mL

樣本

檢測下限

回收率

組織

10

80%-120%

*注:A、B、C、D、E共5個標(biāo)準(zhǔn)品濃度為:0ppb, 1ppb, 3ppb, 9ppb, 27ppb,A、B標(biāo)準(zhǔn)品各1mL,其余各0.5mL,直接使用。

六、溶液配制

配液1: 洗滌工作液

用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進(jìn)行稀釋,用于酶標(biāo)板的洗滌,洗滌工作液在4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫。

配液2: 1×磺胺類稀釋液

   用去離子水將2×磺胺類稀釋液按1: 1的體積比進(jìn)行稀釋,用于樣本前處理的稀釋。

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應(yīng)及時進(jìn)行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。

② 樣本數(shù)目超過8個時推薦使用排槍加樣。

組織(稀釋倍數(shù):10)

 稱取樣品1.0g ± 0.05g至50mL離心管中,加入5mL 2×磺胺類稀釋液和2mL正己烷, 震蕩提取2min;

② 4000rpm離心5min.;

③ 小心取出下層溶液100μL至另一離心管,加入100μL 1×磺胺類樣品稀釋液,震蕩混勻30s,取50μL用于分析。

、 酶標(biāo)免疫測定程序

  • 將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其*回升至室溫后方可使用,根據(jù)體積大小不同取出回溫的時間從1小時~2小時。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  •  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
  •  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µL 到對應(yīng)的微孔中,加入磺胺類抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20min。
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,

加入洗滌工作液300 µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內(nèi)液體,重復(fù)洗滌3次,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

  •  加酶標(biāo)物:加入磺胺類酶標(biāo)物100 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光孵育20 min。
  •  甩干孔內(nèi)液體,重復(fù)洗板3次,后一次用吸水紙拍干。
  •  顯色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物    

液B液50 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。

  • 測定:加入終止液50µL/孔,用酶標(biāo)儀立即  測定450/630nm處的吸光度值。

、 結(jié)果判定

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以磺胺類標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中磺胺類實際濃度。(詳見試劑盒專業(yè)分析軟件,以便進(jìn)行大量樣本的分析計算。)

、 注意事項

① 根據(jù)體積大小不同取出回溫的時間從1小時~2小時,注意避光。

②  洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作

反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

 不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。

⑤ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。

⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色    時間為15min即可。若顏色較淺,可延長反     應(yīng)時間到20min,反之則減短反應(yīng)時間。

⑦ 底物液B液長期使用變?yōu)闇\藍(lán)色時,請放心使用,不影響檢測結(jié)果。

 未提及樣本請致電本公司技術(shù)服務(wù)部。

十一、貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

      保 質(zhì) 期: 12個月

 

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