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喹諾酮類ELISA檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)要描述:喹諾酮類ELISA檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法定量檢測(cè)樣品中喹諾酮類的殘留量。定量檢測(cè)組織、生鮮奶樣本中喹諾酮類殘留。

  • 產(chǎn)品型號(hào):喹諾酮類
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2019-01-24
  • 訪  問(wèn)  量:740
詳情介紹

一、原理

喹諾酮類ELISA檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法定量檢測(cè)樣品喹諾酮類殘留量。

二、適用范圍

喹諾酮類ELISA檢測(cè)試劑盒定量檢測(cè)組織、生鮮奶樣本中喹諾酮類殘留。

三、試劑盒特點(diǎn)及技術(shù)指標(biāo)

* 檢 測(cè) 時(shí) 間 : 30min

  試劑盒靈敏度: 0.1ppb(µg/kg)

* 試劑盒檢測(cè)純陰性樣本的背景值<4ppb;

* 樣品處理方法簡(jiǎn)潔,符合率大于95%;

試劑盒檢測(cè)樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度:

試劑盒交叉反應(yīng)率:

藥物

交叉反應(yīng)率

喹諾酮類(QNS)

100

恩諾沙星(ENR)

100

環(huán)丙沙星(CIF)

86

依諾沙星(EN

 

、所需材料

儀器微孔板酶標(biāo)儀450 nm/630 nm均質(zhì)器、振蕩器離心機(jī)、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:?jiǎn)蔚?1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:去離子水、乙腈、正己烷

、 試劑盒組成

序號(hào)

組成部分

96T裝量

1

喹諾酮類酶標(biāo)板

12×8孔

2

喹諾酮類標(biāo)準(zhǔn)*5

0.5-1mL

3

喹諾酮類酶標(biāo)物

7 mL

4

喹諾酮類抗體

7 mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

2×喹諾酮類樣品稀釋液

40mL

樣本

檢測(cè)下限

回收率

組織

10ppb 

70%-120%

蜂蜜

10ppb 

70%-120%

*注:A、B、C、D、E共5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為:0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb,A、B標(biāo)準(zhǔn)品各1mL,其余各0.5mL,直接使用。

六、溶液配制

配液1: 洗滌工作液

用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進(jìn)行稀釋,用于酶標(biāo)板的洗滌,洗滌工作液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月,用前一天取出回溫。

配液2: 1×喹諾酮類樣品稀釋液

   用去離子水將2×喹諾酮類樣品稀釋液按1: 1的體積比進(jìn)行稀釋,用于樣本前處理的稀釋,

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應(yīng)及時(shí)進(jìn)行下步檢測(cè),實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。② 樣本數(shù)目超過(guò)8個(gè)時(shí)推薦使用排槍加樣。

組織(稀釋倍數(shù):100)

① 稱取樣品1.0g ± 0.05g至50mL離心管中,加入2mL 0.01M 氫氧化鈉,震蕩提取1min,加入2mL乙腈 震蕩提取1min;

② 4000rpm離心5min.;

③ 小心取出層溶液50μL至另一離心管,加入950μL 0.01M PBS,震蕩混勻30s,取50μL用于分析。

生鮮奶(稀釋倍數(shù):100)

10μL生鮮奶至另一離心管,加入990μL 去離子水,震蕩混勻30s,取50μL用于分析。

、 酶標(biāo)免疫測(cè)定程序

  • 將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其*回升至室溫后方可使用,根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~2小時(shí)。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  •  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
  •  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、酶、抗體:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µL到對(duì)應(yīng)的微孔中,加入喹諾酮類酶標(biāo)物50µL/孔,加入喹諾酮類抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20min。
  •  洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,

加入洗滌工作液300 µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內(nèi)液體,重復(fù)洗滌3次,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。

  •  顯色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物    

   液B液50 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜             

     蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。

  • 測(cè)定:加入終止液50µL/孔,用酶標(biāo)儀立即  測(cè)定450/630nm處的吸光度值。

、 結(jié)果判定

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以喹諾酮類標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中喹諾酮類實(shí)際濃度。(詳見(jiàn)試劑盒專業(yè)分析軟件,以便進(jìn)行大量樣本的分析計(jì)算。)

、 注意事項(xiàng)

① 根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~3小時(shí),體積15毫升以上的先從冷藏環(huán)境取出回溫,

②  洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過(guò)了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號(hào)的試劑。

⑤ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。

⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色    時(shí)間為15min即可。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到20min,反之則減短反應(yīng)時(shí)間。

⑦ 底物液B液長(zhǎng)期使用變?yōu)闇\藍(lán)色時(shí),請(qǐng)放心使用,不影響檢測(cè)結(jié)果。

 未提及樣本請(qǐng)致電本公司技術(shù)服務(wù)部。

十一、貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質(zhì) 期: 12個(gè)月

 

 

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