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禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒

簡要描述:禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒用途
批量檢測蛋清、泄殖腔式子、肝臟、病毒培養(yǎng)液等一批中禽白血病病毒,檢測結(jié)果可用于ALV感染的輔助診斷。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2022-04-07
  • 訪  問  量:708
詳情介紹

一、禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒原理

本試劑盒采用直接競爭ELISA方法批量檢測禽白血病病毒抗原。

二、用途

批量檢測蛋清、泄殖腔式子、肝臟、病毒培養(yǎng)液等一批中禽白血病病毒,檢測結(jié)果可用于ALV感染的輔助診斷。

三、禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒所需材料

儀器微孔板酶標儀450 nm/630 nm、振蕩器離心機、、離心管(5 mL, 50 mL

微量移液器:單道 1µL10 µL、10 µL100µL

多道 50µL300µL

試劑:去離子水

五、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

陽性對照酶標板

961-5

2

陽性對照

2mL

3

酶標物

13 mL

4

底物A

7 mL

5

底物B

7 mL

6

終 止 液

7 mL

7

20×濃縮洗滌液

40 mL

8

2×樣品稀釋液

40 mL

六、溶液配制

配液1: 洗滌工作液

  用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋,用于酶標板的洗滌,洗滌工作液在4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫。

配液2: 1 ×樣品稀釋液      

  用去離子水將2 ×樣品稀釋液按1:1體積比進行稀釋。配好1 ×樣品稀釋液4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫。

七、樣本前處理                                                  

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。

② 樣本數(shù)目超過8個時推薦使用排槍加樣。

樣本處理:

蛋清取全蛋,破碎后取蛋清,,-20℃以下凍融1次,用微量移液器吸取蛋清直接進行檢測。

泄殖腔拭子用無菌棉簽于待檢雞只泄殖腔取樣后,放入0.5ml 1×樣品稀釋液中,置-20℃以下凍融1次,劇烈震蕩1分鐘,擠出棉簽中的液體,棄棉簽。以5000r/min離心5分鐘,取上清直接進行檢測。

病毒培養(yǎng)液,取病毒培養(yǎng)液以8000r/min離心10分鐘,取上清直接進行檢測。

④肝臟等組織,取約2g加入0.5ml 1×樣品稀釋液,研磨破碎,置-20℃以下凍融1次,以5000r/min離心5分鐘,取上清直接進行檢測。

酶標免疫測定程序

①將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其*回升至室溫(20~25)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

② 按陽性對照和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。


包被板上對照品和待測樣品添加如下所示:


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S1

S2

S3

S4








B

N












C

P












D

P












E













F













G













H













(注:P表示陽性對照品;N表示陰性對照品;S1、S2、S3、S4等表示待檢樣品)


③加入處理好的待檢樣品,100µL/孔,同時設(shè)陰、陽性對照品(各2),輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37避光環(huán)境中反應30min。

④洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,加入洗滌工作液300 µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內(nèi)液體,重復洗滌3次,最后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

⑤加酶標物:加入酶標物100 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37避光孵育30 min。

.甩干孔內(nèi)液體,重復洗板3次,最后一次用吸水紙拍干。

⑦顯色:加入底物液A50 µL/孔,再加底物液B50 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37避光環(huán)境中反應10min。

測定:加入終止液50µL/孔,用酶標儀立即  測定450nm處的吸光度值。

九、 結(jié)果判定

試驗結(jié)果滿足有效的前提條件是:陽性對照品孔的平均OD450nm>0.20,陰性對照品孔的平均OD450nm<0.10。

S/P=   檢測樣品平均OD450nm/ 陽性對照品孔的平均OD450nm

S/P 0.2時,判定為陽性樣品,數(shù)值越大,陽性越強;檢測樣品0.1 S/P <0.2時,判定為可疑樣品,建議一周后重測; 檢測樣品OD450nm<0.1時為陰性樣品。

、 注意事項

本品僅供體外檢測使用。

樣本前處理完畢后以及洗板拍干后應立即進行下一步操作

反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。試劑盒中的各種液體試劑使用前應充分搖勻,平衡至室溫。

⑤包被板拆封后未使用,應放回鋁箔袋并封口,28保存,應避免受潮,試劑盒使用完畢后應在28下保存。

應嚴格按照試劑盒說明書進行操作,嚴格遵循各操作步驟規(guī)定的時間和溫度。

未提及問題請致電本公司技術(shù)服務部。

十一、貯藏條件及保存期

   貯藏條件: 28

保 質(zhì) 期: 6個月


僅供獸醫(yī)診斷使用

長期提供原核、真核蛋白表達構(gòu)建服務

長期 提供抗原偶聯(lián)、 HRP、生物素、糖基化、親和素、FITC等偶聯(lián)標記多肽、抗體、抗原、蛋白等服務


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