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植物RNA核酸免提取試劑盒(多糖多酚類)

簡要描述:植物RNA核酸免提取試劑盒(多糖多酚類)

試劑盒應(yīng)用
本試劑盒采用專門針對多糖多酚類植物樣本開發(fā)的裂解液PP,在10分鐘內(nèi)完成植物葉片、根、莖、花蕊、種子等的裂解、提取和純化。提取對象包括棉花、馬鈴薯、鐵皮石斛等。整個提取無需使用蛋白酶K等酶類制劑。該配方中含有RNA保護劑,能夠抑制RNA降解、保護RNA完整,從而提高產(chǎn)量。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-04-27
  • 訪  問  量:638
詳情介紹

植物RNA核酸免提取試劑盒(多糖多酚類)

 

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用專門針對多糖多酚類植物樣本開發(fā)的裂解液PP,10分鐘內(nèi)完成植物葉片、根、莖、花蕊、種子等的裂解、提取和純化提取對象包括棉花、馬鈴薯、鐵皮石斛等。整個提取無需使用蛋白酶K等酶類制劑。該配方中含有RNA保護劑,能夠抑制RNA降解、保護RNA完整,從而提高產(chǎn)量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文庫構(gòu)建等。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

 

試劑盒組成

組分

Col-R020250T

編號

裂解液PP

35 mL

Col-R0202A

洗滌液PWA

25 mL

Col-R0202B

洗滌液PWB

12 mL

Col-R0202C

洗脫液P

5 mL


RNA吸附柱

50

Col-R0202E

備注:第一次使用前,在洗滌液PWB中加入48mL無水乙醇,并標(biāo)記“√"和時間,避免重復(fù)加入。

 

保存條件

室溫保存一年

 

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、1.5mLRNase離心管、β-巰基乙醇、DNase I2U/μL,或貨號QR0102

 

使用方法

1. 20-100mg新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后,加入700μL裂解液PP35μLβ-巰基乙醇,渦30秒。

2. 55℃孵育1分鐘。

備注:淀粉含量高的樣本直接進(jìn)行步驟3。

3. 12,000rpm離心1分鐘,吸取500μL上清液。

4. 加入250μL無水乙醇,上下顛倒混勻。

5. 全部加入RNA吸附柱中,12,000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中廢液。

6. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液PWA,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

7. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液PWB12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

8. 重復(fù)步驟7一次。

9. 12,000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。

10. RNA吸附柱放入新1.5mLRNase離心管,加入30-50μL 洗脫液P,室溫放置1分鐘。 

11. 12,000rpm離心2分鐘,得到RNA溶液,-80℃保存。

 

注意事項

1. 務(wù)必在超凈臺中進(jìn)行操作,常換手套,防止RNA降解。

2. 盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取。

3. 使用無DNaseRNase的吸頭和離心管,防止RNA降解,常更換吸頭,防止交叉污染。

4. 為了提高洗脫效率,可提前將洗脫液PP置于65℃水浴后再使用。

5. 根據(jù)后續(xù)試驗需求,請使用DNase I(貨號QR0102)進(jìn)行基因組清除。

 

常見問題解析

問題

可能原因

推薦解決方案

RNA吸附柱

堵塞

(1)上樣量太高

(2)加入RNA吸附柱的液體中有固體成分或沉淀物

(1)減少上樣量。

(2)增加離心時間。

(3)切勿吸取到可見固體成分。

(4)再次離心。

RNA得率低

(1)未離心下來

(2)樣本量太大,裂解不充分

(1)減少樣本量。

(2)重復(fù)洗脫步驟一次。

RNA降解

(1)樣本不新鮮

(2)RNA酶污染

(1)使用新鮮樣本。

(2)使用保存在樣品保存液中樣本。

(3)樣本保存在-80℃甚至液氮中,盡可能現(xiàn)取現(xiàn)用。

(4)常更換手套。

(5)常更換吸頭和離心管。

(6)使用無DNaseRNase的吸頭和離心管。

 


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