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植物RNA核酸免提取試劑盒(高產量)

簡要描述:植物RNA核酸免提取試劑盒(高產量)

試劑盒應用
本試劑盒采用專門針對植物樣本特性的裂解液PD在10分鐘內完成植物葉片、根、莖、花蕊、種子等的裂解、提取和純化。提取對象包括水稻、玉米、小麥、油菜等作物。裂解液PD具有高效性能,充分釋放植物中RNA,從而獲得最大產量RNA。整個提取無需使用蛋白酶K等酶類制劑。該配方中含有RNA保護劑,能夠抑制RNA降解、保護RNA完整,從而提高產量。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2023-04-27
  • 訪  問  量:597
詳情介紹

植物RNA核酸免提取試劑盒(高產量)

 

試劑盒應用

本試劑盒采用專門針對植物樣本特性的裂解液PD10分鐘內完成植物葉片、根、莖、花蕊、種子等的裂解、提取和純化。提取對象包括水稻、玉米、小麥、油菜等作物。裂解液PD具有高效性能,充分釋放植物中RNA,從而獲得最大產量RNA。整個提取無需使用蛋白酶K等酶類制劑。該配方中含有RNA保護劑,能夠抑制RNA降解、保護RNA完整,從而提高產量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCRNorthern Blot、分子克隆、文庫構建等。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

 

試劑盒組成

組分

Col-R020150T

編號

裂解液PD

35 mL

Col-R0203A

洗滌液WA

25 mL

Col-R0203B

洗滌液WB

12 mL

Col-R0203C

洗脫液P

5 mL


RNA吸附柱

50

Col-R0203E

備注:第一次使用前,在洗滌液WB中加入48mL無水乙醇,并標記“√"和時間,避免重復加入。

 

保存條件

室溫保存一年。

 

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、1.5mLRNase離心管、β-巰基乙醇、DNase I2U/μL,或貨號QR0102

 

使用方法

1. 20-100mg新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后,加入700μL裂解液PD14μLβ-巰基乙醇,渦旋30秒。

2. 55℃孵育1分鐘。

備注:淀粉含量高,例如馬鈴薯等直接進行步驟3

3. 12,000rpm離心1分鐘,吸取500μL上清液。

4. 加入250μL無水乙醇,上下顛倒混勻。

5. 全部加入RNA吸附柱中,12,000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中廢液。

6. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液WA,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

7. RNA吸附柱中加入500μL洗滌液WB,12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

8. 重復步驟7一次。

9. 12,000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。

10. RNA吸附柱放入新1.5mLRNase離心管,加入30-50μL 洗脫液P,室溫放置1分鐘。

11. 12,000rpm離心2分鐘,得到RNA溶液,-80℃保存。

 

注意事項

1. 務必在超凈臺中進行操作,常換手套,防止RNA降解。

2. 盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取。

3. 使用無DNaseRNase的吸頭和離心管,防止RNA降解,常更換吸頭,防止交叉污染。

4. 為了提高洗脫效率,可提前將洗脫液P置于65℃水浴后再使用。

5. 根據(jù)后續(xù)試驗需求,請使用DNase I(貨號QR0102)進行基因組清除。

 

常見問題解析

問題

可能原因

推薦解決方案

RNA吸附柱

堵塞

(1)上樣量太高

(2)加入RNA吸附柱的液體中有固體成分或沉淀物

(1)減少上樣量。

(2)增加離心時間。

(3)切勿吸取到可見固體成分。

(4)再次離心。

RNA得率低

(1)未離心下來

(2)樣本量太大,裂解不充分

(1)減少樣本量。

(2)重復洗脫步驟一次。

RNA降解

(1)樣本不新鮮

(2)RNA酶污染

(1)使用新鮮樣本。

(2)使用保存在樣品保存液中樣本。

(3)樣本保存在-80℃甚至液氮中,盡可能現(xiàn)取現(xiàn)用。

(4)常更換手套。

(5)常更換吸頭和離心管。

(6)使用無DNaseRNase的吸頭和離心管。

 


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