快速DNA免核酸提取熒光PCR檢測(cè)試劑盒

試劑盒簡(jiǎn)介：本試劑盒中采用du特配方，能夠快速高效的裂解各種常見(jiàn)樣本，無(wú)需液氮研磨，無(wú)需使用有機(jī)試劑，無(wú)需重復(fù)離心便可獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA無(wú)需進(jìn)行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、Lamp等擴(kuò)增。本產(chǎn)品可用于各種植物（煙草、擬南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麥等）以及各種植物蛋白飲料中基因組DNA的提取。2×熒光PCR MIX 試劑中引入了dUTP/UDG防污染系統(tǒng)，可消除擴(kuò)增污染對(duì)qPCR的影響。

試劑盒組成

保存期：-20oC 保存，保存期一年。

注意：使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻。

準(zhǔn)備的儀器：金屬恒溫浴、離心機(jī)、移液器、PCR儀

使用方法

一、 不同樣品的處理方法

（一）植物樣品的處理

1. 葉片的處理

（1）用眼科剪或葉片取樣器剪取1-4mm的葉片。

（2）加入20 μL DNA Lysis。

（3）充分混勻。

（4）置于55℃作用5分鐘，加入100µL樣品稀釋液混勻，取1-2μL作為PCR反應(yīng)模板。

2.種子和果實(shí)的處理

（1）研磨后種子或1-2mm果肉放入離心管中。

（2）加入20 μL DNA Lysis。

（3）充分混勻。

（4）置于55℃作用5分鐘，加入100µL樣品稀釋液混勻。

（5）10,000rpm離心1分鐘，取1-2μL作為PCR反應(yīng)模板。

（二）植物蛋白飲料樣品的處理

（1）吸取20 μL DNA Lysis，放入離心管中。

（2）吸取10μL 待檢測(cè)樣品，加入（1）中，混勻。

（3）置于55℃作用5分鐘后，加入100µL樣品稀釋液混勻。

（4）取1μL作為熒光PCR反應(yīng)模板。

二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應(yīng)體系

三、反應(yīng)程序

注意事項(xiàng)

（1）在進(jìn)行大量樣品檢測(cè)時(shí)，可將本試劑盒的試劑預(yù)分裝到8聯(lián) PCR管，用多通道移液器進(jìn)行多樣本的處理。

（2）取樣的細(xì)胞量應(yīng)當(dāng)適中，濃度不宜過(guò)高或過(guò)低，處理后溶液應(yīng)當(dāng)以透明為宜。擴(kuò)增細(xì)胞DNA 時(shí)，取2000個(gè)細(xì)胞以?xún)?nèi)即可；擴(kuò)增病毒基因時(shí)需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細(xì)胞數(shù)量。

（3）樣品處理過(guò)程中應(yīng)當(dāng)防止交叉污染，推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過(guò)程，以檢測(cè)環(huán)境的污染。

（4）PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預(yù)測(cè)Tm值減去5℃，或者通過(guò)梯度PCR摸索最佳退火溫度。

（5）用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存 1個(gè)月。

（6）為防止試劑盒污染，請(qǐng)勿將不同批號(hào)試劑盒混用。